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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21455-24S |
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Chemical Name | HK21455-24S 土壤脲酶(UE)测试盒 (可见分光光度法) |
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Qty 1 |
50T/24S |
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References | S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。 测定原理: 利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目筛、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50 目筛。 二、试剂准备 1、试剂R1:自备甲苯; 2、试剂R2:临用前取1 瓶加入10 mL 蒸馏水,充分溶解待用,用不完的试剂2-8℃保存4 周; 3、试剂R4:临用前将A 液和B 液按体积比1:4 混合待用;用多少配多少; 4、试剂R5:液体置于试剂瓶内EP 管中,使用前需先离心。临用前加入9.5 mL 蒸馏水,混匀,待用;用不完的试剂2-8℃保存两周; 5、标准品:1 mg/mL 氮标准液。 三、测定步骤 1、分光光度计预热30min 以上,调节波长至630nm,用蒸馏水调零。 2、培养
3、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。若最终计算得到的ΔA仍大于1则继续稀释。 4、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,用蒸馏水稀释至8、6、4、2、1、0.5、0.25、0(空白管)μg/mL。备注:实验中每个标准管需360μL 标准液。 5、测氨量
充分混匀,微量玻璃比色皿需要用蒸馏水调零,96 孔板不需要调零,于630nm 处读取吸光值A,分别记为A测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管,每个测定管设一个对照管。标准曲线和空白管只需测1-2 次。 四、S-UE活力计算 1、标曲绘制 标准曲线的建立:根据标准管的浓度(x,μmol/L)和吸光度ΔA 标准(y,ΔA 标准),建立标准曲线。根据 标准曲线,将ΔA 测定(y,ΔA 测定)带入公式计算样本浓度(x,μmol/L)。 2、S-UE活力计算 单位的定义:每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。 S-UE活力(U/g 土样)=x×10×V反总÷W÷T 10:稀释倍数; T:反应时间,1d; V反总:反应体系总体积; W:样本质量。 本试剂盒仅供科研使用! |
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