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| Cat. Number | HK21451-24S |
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| Chemical Name | HK21451-24S 土壤锰过氧化物酶(S-Mnp)测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/24S |
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| References | 锰过氧化物酶（Mnp）（EC1.11.1.13）是一种普遍存在于细菌和真菌中的微生物木质素分解酶，在微生物木质素分解系统中起着关键作用，它可以有效的降解木质素以及废水和土壤中比较难降解的化合物，在生物制浆、生物漂白和污染物的生物降解等工业领域具有广泛应用。
锰过氧化物酶在Mn2+环境下，可将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，四邻甲氧基连酚在465nm 处有吸收峰，通过检测465nm 处吸光值的变化，可测定锰过氧化物酶的活性。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声波细胞破碎仪、研钵/匀浆器、1mL玻璃比色皿、震荡仪、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50 目筛。 二、试剂准备 试剂R4：临用前根据实验所需量按照试剂R4（μL）：蒸馏水（μL）=1:49 的比例配制，现用现配。 三、测定步骤 1、可见分光光度计预热30min 以上，调节波长至465nm，蒸馏水调零。 2、测定前根据实验用量取出部分试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他动物）预热10min 以上。 3、加样表（在 1mL 玻璃比色皿中依次加入下列试剂)：
将上述试剂分别加入1mL玻璃比色皿后迅速吹打混匀，记录第30s 的吸光值A1以及10min30s 时的吸光值A2，计算ΔA =A2-A1。若一次性测定样本过多，可根据使用量将试剂R1、R2、R3、R4按5:1:2:1 比例配成工作液后进行预热，测定时按照100μL 样本+900μL 工作液加入1mL 玻璃比色皿进行测定。 四、Mnp 活力的计算 单位定义：每天每g土样每分钟氧化1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活单位。 土壤中Mnp 活性（U /g 土样）= ΔA×V 反总÷(ɛ×d)×109÷(V 样÷V 样总×W)÷T ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100 L/mol/cm； d：比色皿光径，1cm； V 反总：反应总体积； V 样：加入样本体积； V 样总：提取液体积； W：样本质量，g； T：反应时间，10 min； 109：单位换算系数，1mol=109nmol。 注意事项： 当A1 大于1.2 或者ΔA 大于0.5 时，建议将样本用试剂R1稀释后测定；当ΔA 过小时，可以适当加大样本量后重新进行测定。注意同步修改计算公式。 本试剂盒仅供科研使用! |
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