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| Cat. Number | HK21450-96S |
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| Chemical Name | HK21450-96S 土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒(酶标板法) |
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| Qty 1 |
100T/96S |
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| References | 土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影响。通常按照其最适 pH 范围，分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。 检测原理： 碱性环境中，S-AKP/ALP 催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，660nm处测定，通过测定酚的生成量即可计算出 S-AKP/ALP 活性。 需自备的仪器和用品： 分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、研钵、蒸馏水、30-50 目筛、乙醇和甲苯（不允许快递）。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 1. 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50 目筛。 2. 称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL 甲苯（自备），轻摇15min；加0.4mL 试剂R1并且摇匀后，置于37℃水浴锅/恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL 试剂R2充分混匀，以终止酶催化的反应。10000rpm 室温离心10min，取上清液置于冰上待测。 二、试剂准备： 1．试剂R2：临用前加100 mL 蒸馏水充分溶解，2-8℃保存8 周； 2．试剂R4：临用前取1 支加576 μL 无水乙醇（自备），24 μL 蒸馏水充分溶解。用不完的试剂2-8℃保存一周（变褐色后不能再使用，一瓶即可以实验100T，为延长反应时间故多给一瓶）； 3．标准品：0.5 μmol/mL 苯酚标准液。 二、测定步骤 1. 分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长到660nm，分光光度计蒸馏水调零。 2. 操作表
混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A 空白管、A 标准管、A 测定管。（标准管只需要测定1-2 次） 四、S-AKP/ALP 活性计算 活性单位定义：37℃中每克土壤每天释放1nmol 酚为1个酶活单位。 S-AKP/ALP（U/g 土样）=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W÷T×1000 C 标准液：标准液浓度； V 总：催化体系总体积； W：土壤样本质量，g； T：催化反应时间，24 h=1d； 1000：单位换算系数，1μmol=1000nmol。 本试剂盒仅供科研使用! |
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