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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21442-48S |
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Chemical Name | HK21442-48S 土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/48S |
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References | 土壤过氧化氢酶S-CAT 是土壤微生物代谢的重要酶类,在 H2O2清除系统中具有重要作用。 测定原理: H2O2在 240nm 下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应 S-CAT 活性的高低。 需要的仪器,耗材: 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV板)、研钵、30~50目筛和蒸馏水。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。 二、试剂准备 1、 试剂R1:液体置于试剂瓶内EP管中,使用前需将EP管先离心。临用前取0.05 mL试剂R1加入9.95 mL蒸馏水稀释待用或者按比例配制。用不完的试剂8℃保存一周; 2、 试剂R2:临用前加入1 mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂2-8℃保存4周。 三、 测定步骤 1、 分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长至240nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2、 加样表(1.5ml EP管):
混匀,取200μL至微量石英比色皿或96孔板(UV板)中,240nm处记录各管吸光值A。(每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做1-2管) 四、 S-CAT活性计算 A、用微量石英比色皿测定的计算公式如下 单位的定义:每天每g风干土样催化1mmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。 计算公式:S-CAT(U/g 土样)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×103]÷W÷T V反总:反应体系总体积; ε:过氧化氢摩尔消光系数,43.6 L/mol/cm; d:比色皿光径,1cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样本质量,0.03g。 B、用96孔板测定的计算公式如下 单位的定义:每天每g风干土样催化1mmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。 计算公式:S-CAT(U/g 土样)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×103]÷W÷T V反总:反应体系总体积; ε:过氧化氢摩尔消光系数,43.6 L/mol/cm; d:96孔板光径,0.6cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样本质量。 注意事项: 如果吸取的上清仍有部分浑浊,可以在加入试剂R3后统一再次进行离心。 本试剂盒仅供科研使用! |
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