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Cat. Number
HK21440-96S
Chemical Name
HK21440-96S 土壤汞(S-Hg)浓度测试盒(酶标板法)
Qty 1
100T/96S
References

土壤汞污染能够通过食物链传递和富集,对植物、动物和人类健康产生威胁。矿山开发、工 业加工、农业生产和生活垃圾常常造成土壤汞污染,因此评价和防止土壤重金属污染常常需 要测定土壤汞含量。 


测定原理: 

土壤经消化后,汞以 Hg2+离子形式存在;Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物,溶于三氯甲烷 后,在 490nm 测定吸光度,即可计算 S-Hg 含量。


需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板(非聚丙烯/聚苯乙烯材质)、恒温水浴锅、可调式移液枪、30~50目筛、浓硫酸、浓硝酸、三氯甲烷(氯仿)、研钵、蒸馏水。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂R1粉剂×2 支2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
试剂R3液体×1 瓶2-8℃
试剂R4粉剂×1 瓶2-8℃
试剂R5粉剂×2 瓶2-8℃
试剂R6液体×1 瓶2-8℃
标准品液体×1 支2-8℃


实验步骤:

注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50 目筛。

二、试剂准备

1、试剂R1:临用前取1 支加入1 mL 蒸馏水溶解后待用,用不完试剂2-8℃保存一周;

2、试剂R4:临用前加入5 mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完试剂2-8℃保存两周;

3、试剂R5:临用前取1 瓶加三氯甲烷(自备)25 mL 充分溶解,用不完试剂2-8℃保存一周;

4、标准品:4000 nmol/mL Hg2+。临用前用水稀释400 倍即10 nmol/mL 标准溶液(在3.99mL 蒸馏水中加入0.01mL 4000 nmol/mL Hg2+),现用现配。

三、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长至490nm,分光光度计氯仿调零。

2、操作表:在1.5mLEP 管中分别加入

试剂名称(uL)测定管标准管空白管
土样(g)0.04--
标准溶液-400-
蒸馏水400-400

浓硫酸

161616
浓硝酸444
试剂R1
131313
试剂R21602525
                                         封口膜封口,充分混匀,震荡2min。95℃水浴中消化2 小时,冷却至大约40℃。
试剂R3505050
                                  震荡至EP 管内溶液澄清透明,开盖放置10min,期间摇荡数次,使其中气体溢出。
试剂R4
323232
                                 充分混匀后,10000rpm 常温离心10min。吸取全部上清液于2mLEP 管中,之后加入
试剂R5
400400400
                                        盖紧后充分震荡2min,静置10min,吸取下层有机相300μL 至1.5mL EP 管中。
试剂R6
160160160
充分震荡使有机相无绿色或呈浅绿色,静置分层后吸取200μL 下层有机相于微量玻璃比色皿/96 孔板中测定其在490nm 波长下的吸光度,分别记为A 测定,A 标准,A 空白,计算ΔA 测定=A 测定-A 空白,ΔA 标准=A 标准-A 空白(空白管和标准管只需检测1-2 次)。

四、汞离子浓度计算

Hg2+(nmol/g)= C 标准品×ΔA 测定÷ΔA 标×V 标准÷W

C 标准品:标准品浓度;

V 标准:标准溶液加入的体积;

W:土样质量,g。


注意事项:

1、土样中1000μg/L 铜离子,20μg/L 银离子,10μg/L 金离子,5μg/L 铂离子对测定无干扰。

2.、测定过程中应注意安全,佩戴口罩和手套,以免吸入或沾到有毒及危险试剂。

3.、当吸光度大于1 时,建议减少样本量或者将加试剂五之前的上清用蒸馏水稀释后再继续操作。

4、加入试剂R2后样本管呈粉红色或紫黑色(可能由于土壤影响颜色偏棕色)。若消化过程中样本管上层溶液变透明,可以适当加入试剂R2使样本管保持粉红或黑紫色。

5、若加入的试剂R3不足以使样本管变澄清,可以适当增加试剂R3的加入量来使样本管变澄清。

6、若加入试剂R6后,下层有机相仍呈现很明显的绿色,可以适当增加试剂R6的加入量来使下层有机相变浅。


本试剂盒仅供科研使用!

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