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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21438-96S |
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Chemical Name | HK21438-96S 土壤多酚氧化酶(PPO)测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/96S |
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References | 土壤多酚氧化酶S-PPO主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与二壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质禾口色素,完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。 测定原理: 土壤多酚氧化酶S-PPO能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素,后者在430nm有有特征光吸收。 需要的仪器,耗材: 1、可见分光光度计 2、台式离心机 3、水浴锅 4、可调式移液器 5、玻璃比色皿 6、研钵/匀浆器 7、冰和蒸馏水。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(具体比例可以参考文献) 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。 二、试剂准备 1、提取液:临用前将粉剂一倒入提取液中,溶液为悬浊液,使用前需摇匀。 二、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至430nm,蒸馏水调零。 2、标准液稀释:用0.5mol/L HCL溶液将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0 mg/mL。 标准液稀释表:
3、样本测定 在EP 管中依次加入下列试剂:
振荡数次,室温静置30min,取200uL上层液于微量玻璃比色皿/96孔板中,430nm处测定吸光值A。 四、S-PPO活性计算 以0mg/mL的标准液调零,取200uL稀释好的标准液于微量玻璃比色皿/96孔板中在430nm处测定吸光值A,根据吸光度(x)和浓度(y,mg/mL)做出标准曲线。 2、根据标准曲线,将样本吸光值A带入公式中(x),计算出样本浓度y(mg/mL)。 单位的定义:每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。 S-PPO(U/g 土样)=y×V提取相÷W÷T =516×y T:反应时间,1h=1/24d; V提取相:提取相总体积; W:样本质量。 注意事项: 不同样本的多酚氧化酶最佳的反应温度略有差别,可在25-37℃之间进行调节。 本试剂盒仅供科研使用! |
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