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| Cat. Number | HK21437-48S |
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| Chemical Name | HK21437-48S 土壤多酚氧化酶(PPO)测试盒(可见分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/48S |
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| References | 土壤多酚氧化酶S-PPO主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌与二壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质禾口色素，完成土壤芳香族化合物循环，用于土壤环境修复。 测定原理： 土壤多酚氧化酶S-PPO能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素，后者在430nm有有特征光吸收。 需要的仪器，耗材: 1、可见分光光度计 2、台式离心机 3、水浴锅 4、可调式移液器 5、玻璃比色皿 6、研钵/匀浆器 7、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（具体比例可以参考文献） 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。 二、试剂准备 1、试剂R1：临用前取1 瓶加入15 mL 蒸馏水，用不完的试剂 2-8℃保存2 周； 2、试剂R3：自备乙醚； 3、标准液：重铬酸钾溶液（5 mmol/L），相当于0.2 mg/mL 紫色没食子素溶液。 三、测定步骤 1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至430nm，试剂R3调零。 2、标准液稀释：用0.5mol/L HCL溶液将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0 mg/mL。 标准液稀释表：
3、样本测定 在EP 管中依次加入下列试剂：
振荡数次，室温静置30min，取1000uL上层液于1mL玻璃比色皿中，430nm处测定吸光值A。 四、S-PPO活性计算 以0mg/mL的标准液调零，取1000uL稀释好的标准液于玻璃比色皿中，在430nm处测定吸光值A，根据吸光度(x)和浓度(y，mg/mL)做出标准曲线。 2、根据标准曲线，将样本吸光值A带入公式中（x），计算出样本浓度y（mg/mL）。 单位的定义：每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。 S-PPO（U/g 土样）=y×V提取相÷W÷T T：反应时间，1h=1/24d； V提取相：提取相总体积； W：样本质量。 注意事项： 不同样本的多酚氧化酶最佳的反应温度略有差别，可在25-37℃之间进行调节。 本试剂盒仅供科研使用! |
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