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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21436-48S |
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Chemical Name | HK21436-48S 土壤淀粉酶(S-AL)测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/48S |
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References | 淀粉酶(EC321.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物, 是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。 测定原理: 淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在540nm处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。 需自备的仪器和用品: 天平、恒温培养箱/水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目筛、研钵、甲苯(不允许快递)。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50 目筛。 二、试剂准备 1、试剂R2:临用前取1 瓶加入5 mL 蒸馏水,置于常温水中并加热至煮沸,期间不断搅拌或震荡至粉剂溶解,用不完的试剂2-8℃保存一周。 2、标准品:10 mg 麦芽糖。临用前加入1.38 mL 蒸馏水配制成20 μmol/mL 的储备液,2-8℃保存两周。 三、测定步骤 1.分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至540nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2. 将20μmol/mL的麦芽糖储备液用蒸馏水稀释为2、1、0.8、0.6、0.4μmol/mL的标准溶液备用。 3. 操作表:
四、土壤淀粉酶活力的计算 1、标准曲线的绘制: 根据标准管的浓度(x,μmol/L)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,μmol/L) 2、酶活的计算: 单位的定义:每天每g土样产生1μmol还原糖定义为一个土壤淀粉酶活力。 S-AL(U/g 土样)= x×V反总÷W÷T V反总:酶促反应总体积; W:土样质量,g; T:反应时间,1d。 注意事项: 1、当ΔA 大于1.5 时,建议将上清液稀释后再进行测定,注意在计算公式中乘以稀释倍数。 2、若ΔA 测定较小,增加反应的上清液体积或适当增加酶促反应时间,计算酶活时对公式进行修改。 3、建议每次实验煮沸后的冷却时间保持一致,吸光值请于30min 内测定完成。 本试剂盒仅供科研使用! |
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