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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21430-48S |
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Chemical Name | HK21430-48S 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/48S |
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References | 土壤β-葡萄糖苷酶S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。 测定原理: S-β-GC能够催化对-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、30~50目筛、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 新鲜土样自然风干或37 度烘箱风干,过30~50 目筛。 二、试剂准备 1、试剂R1:自备甲苯; 2、试剂R2:临用前取1 瓶加入7.5 mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂建议-20℃分装保存4 周; 3、标准液:5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液; 4、标准液的准备:取100μL 标准液,加入到400μL 试剂R3中,得到1 mmol/L 标准液(即1000 μmol/L),再用蒸馏水十倍稀释到100 μmol/L。 三、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至400nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2、用蒸馏水倍比稀释:50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L 做标准液。 3、加样表:
充分混匀,室温静置2min 后,测定400nm 处吸光值A,计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=标准定管-A 空白管。(每个测定管设一个对照管) 四、S-β-GC 酶活的计算 1、标准曲线建立: 根据标准管的浓度(y,μmol/L)和吸光度ΔA 标准(x,ΔA 标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(x,ΔA 测定)带入公式计算样本浓度(y,μmol/L)。 2、S-β-GC 酶活的计算: 单位的定义:每天每g 土样中产生1μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。 S-β-GC 酶活(U/g 土样)=y×V 反总÷W÷T T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:3×10-4L; W:样本质量,0.02g。 本试剂盒仅供科研使用! |
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