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Cat. Number
HK21425-24S
Chemical Name
HK21425-24S 铜蓝蛋白含量测试盒(可见分光光度法)
Qty 1
50T/24S
References

铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。


测定原理:

铜蓝蛋白催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在645nm处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。


需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、蒸馏水。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂R1液体×1 瓶2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
试剂R3液体×1 瓶2-8℃


实验步骤:

注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理

血清(浆)直接检测。

二、试剂准备

1、试剂R3:临用前根据样本量取出适量的试剂,置于37℃水浴锅/恒温培养箱中预热15min。

三、测定步骤

1、分光光度计预热30min 以上,调节波长至645nm,用蒸馏水调零。

2、操作表:

试剂名称(uL)对照管测定管
样本3030
试剂R19090
试剂R260-
                                                      涡旋混匀,置于37℃水浴锅/恒温培养箱预热5min
试剂R3120120
                                               涡旋混匀,置于37℃水浴锅/恒温培养箱准确反应30min
试剂R2-60
涡旋混匀,室温放置5min,取200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中。测定645nm 处吸光值,分别记为A 对照、A 测定。ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管需设一个对照管。

四、计算公式

单位定义:37℃、1mL 反应体系条件下, 每分钟每mL 样本与底物作用吸光度升高0.01 为一个酶活单位。

Cp 活力(U/mL)=ΔA×(V 反总÷1)÷0.01÷T÷V 样

T:反应时间,30min;

V 样:加入样本体积;

V 反总:反应总体积;

1:1mL 反应体系条件。


注意事项:

试剂R2和试剂R3有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。


本试剂盒仅供科研使用!

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