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Cat. Number
HK21402-96S
Chemical Name
HK21402-96S 水样中汞离子(Hg2+)浓度测试盒(酶标板法)
Qty 1
100T/96S
References

汞离子Hg2+是水体中重要有毒重金属离子,易被生物体吸收并且积累,能够通过食物链进一步传递,从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。


测定原理:

水样经消化后,在酸性环境中,Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物,溶于三氯甲烷,在490nm测定吸光度,即可计算Hg2+含量。


需自备的仪器和用品:

台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板(非聚丙烯/聚苯乙烯材质)、可调式移液枪、浓硫酸、浓硝酸、三氯甲烷(氯仿)、蒸馏水。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂R1粉剂×2支2-8℃
试剂R2液体×1瓶2-8℃
试剂R3液体×1瓶2-8℃
试剂R4粉剂×1瓶2-8℃
试剂R5粉剂×2瓶2-8℃
试剂R6液体×1瓶2-8℃
标准品液体×1支常温


实验步骤:

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

每采集1000mL水样后立即加入7mL硝酸,调节每个样本的pH,使之低于或等于1。若取样后不能立即测量,向每升样本中加入4mL试剂R2或更多,使之呈现持久的淡红色。

二、试剂准备

1、试剂R1:临用前取1支加入1 mL蒸馏水溶解,用不完的试剂分装-20°C保存一周,避免反复冻融;

2、试剂R4:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂2-8°C保存两周;

3、试剂R5:取1瓶加三氯甲烷(自备)25 mL充分溶解,用不完的试剂2-8°C保存一周;

4、标准品:4000 nmolmL Hg2+。临用前用水稀释400倍即10 nmolmL标准溶液备用,现配现用(可以先将20uL 4000 nmolmL Hg2+标准溶液和180uL蒸馏水混合的400 nmolmL Hg2+,再吸取其50uL与1.95mL整理水混匀,即得10 nmol/mL标准溶液)。

三、测定步骤

1、可见分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长至490nm,氯仿调零。

2、操作表(在1.5mLEP管中分别加入):

试剂名称测定管标准管空白管
水样400--
标准溶液-400-
蒸馏水--400
浓硫酸161616
浓硝酸444
试剂R1131313
试剂R2242424
                              封口膜封口,充分混匀,震荡2min。95C水浴中消化2小时,冷却至大约40°C。
试剂R3808080
                                震荡至EP管内溶液澄清透明,开盖放置10min,期间摇荡数次,使其中气体溢出。
试剂R4323232
试剂R5400400400
                                    盖紧后充分震荡2min,静置10min,吸取下层有机相300uL至1.5mL EP管中。
试剂R6160160160
充分震荡使有机相无绿色,静置分层后吸取200uL有机相于微量玻璃比色皿中/96孔板中,测定其在490nm波长下的吸光度,分别记为A测定,A标准,A空白,计算ΔA测定=A测定-A空白,ΔA标准=A标准-A空白。标准管和空白管只需测1-2次。

四、汞离子浓度计算

Hg2+ (nmol/mL) =C标准品×ΔA测定÷ΔA标准

C标准品:标准品浓度。


注意事项:

1. 水样中1000ug/L铜离子,20ugL银离子,10ug/L金离子,5ug/L铂离子对测定无干扰。

2. 测定过程中应注意安全,佩戴口罩和手套,以免吸入或沾到有毒及危险试剂。

3. 当吸光度大于0.6时,建议用蒸馏水稀释后测定。

4. 含悬浮物和(或)有机物较少的水可把加热时间缩短为 1h,不含悬浮物的较清洁水可把加热时间缩短为30min。

5. 若消化过程中样本管上层溶液变透明,可以适当加入试剂R2使样本管保持粉红或黑紫色。

6. 若加入的试剂R3不足以使样本管变澄清,可以适当增加试剂R3的加入量来使样本管变澄清。

7. 若加入试剂R6后,下层有机相仍呈现很明显的绿色,可以适当增加试剂R6的加入量来使下层有机相变浅。

8. 聚丙烯/聚苯乙烯材质易溶于氯仿等有机试剂。


本试剂盒仅供科研使用!

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