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Cat. Number
HK21396-96S
Chemical Name
HK21396-96S 食品中亚硝酸盐含量测试盒(酶标板法)
Qty 1
100T/96S
References

在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。


测定原理:

在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。


需自备的仪器和用品:

天平、研钵/匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。


产品组成:

试剂名称规格保存条件
提取液1液体×1 瓶常温
提取液2液体×1 瓶常温
提取液3液体×1 瓶常温
提取液4粉剂×1 瓶常温
试剂R1液体×1 瓶2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
标准品液体×1 瓶2-8℃


实验步驟:

注意:实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

称取样本约0.5g,破碎,加入0.5mL 提取液1,沸水浴15min,冷却至室温,加入0.5mL 提取液2,震荡摇匀,加0.5mL 提取液3,用镊子加少量提取液4(约1mg),静置30min,10000rpm/min 离心15min,取上清液待测。

二、试剂准备

1、标准品:1μmol/mL亚硝酸钠标准溶液。将标准品用蒸馏水稀释成0.04μmol/mL备用。

三、测定步骤:

1. 可见分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2. 操作表

试剂名称(uL)空白管测定光标准管
样本-100-
标准管--100
蒸馏水100--
试剂R1100100100
试剂R2100100100
           混匀,室温静置15min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板中检测A540吸光值。(空白管只需测定1-2次)

四、亚硝酸含量计算:

1、按样本质量计算:

亚硝酸含量(μmol/g 质量)=(A样本-A空白)÷[(A标准-A空白)÷C标准] ×V样本÷(W×V样本÷V总)

2、按样本蛋白浓度计算:

亚硝酸含量(μmol/mg prot)=(A样本-A空白)÷[(A标准-A空白)÷C标准] ×V样本÷(Cpr×V样本)

V总:加入提取液体积;

V样本:反应中样本体积;

C标准:标准溶液浓度;

Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;

W:样本质量,g。


注意事项:

1. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。

2. 如果样本吸光值大于1.5,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。


本试剂盒仅供科研使用!

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