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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | HK21392-96S |
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Chemical Name | HK21392-96S 山梨醇含量测试盒(酶标板法) |
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Qty 1 |
100T/96S |
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References | 山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是糖运输形式之一,而且与生物 抗逆性和食物风味密切相关。因此,在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。 测定原理: 山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物,在 655nm 波长有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。 产品组成:
实验步骤: 注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 称取约0.1g 样本,加入 1mL蒸馏水研磨成匀浆,置沸水浴中煮沸10分钟(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,8000g,常温离心10min,取上清液待测。 二、试剂准备 1、标准品:临用前将标准品用1mL蒸馏水溶解,配制成浓度为10 mg/mL的标准液待用,2-8℃可保存2周。 三、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至655nm,分光光度计用蒸馏水调零。 2、标准溶液的制备:临用前将10mg/mL标准液用蒸馏水稀释至4、2、1、0.5、0.25、0.125、0(空白管)mg/mL标准溶液待测。 3、样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):
四、山梨醇含量计算 1、根据标准管的浓度(y,mg/mL)和吸光度A(x,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将A测定(x,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(y,mg/mL)。 2、按照样本质量计算 山梨醇含量(mg/g质量)=y×V1÷(W×V1÷V2) 3、按照样本蛋白浓度计算 山梨醇含量(mg/mg prot)=y×V1÷(V1×Cpr) V1:加入样本体积; V2:加入蒸馏水体积; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g。 注意事项: 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。 本试剂盒仅供科研使用! |
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