您的位置:首页>>分析化学>>试剂盒>>HK21391-48S 山梨醇含量测试盒(可见分光光度法)
Cat. Number
HK21391-48S
Chemical Name
HK21391-48S 山梨醇含量测试盒(可见分光光度法)
Qty 1
50T/48S
References

山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是糖运输形式之一,而且与生物 抗逆性和食物风味密切相关。因此,在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。 


测定原理: 

山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物,在655nm 波长有特征吸收峰。


需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。


产品组成:


试剂名称规格保存条件
试剂R1液体×1 瓶2-8℃
试剂R2液体×1 瓶2-8℃
标准品粉剂×1 支2-8℃


实验步骤:

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

称取约0.1g 样本,加入1mL蒸馏水研磨成匀浆,置沸水浴中煮沸10分钟(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,8000g,常温离心10min,取上清液待测。

二、试剂准备

1、标准品:临用前将标准品用1mL蒸馏水溶解,配制成浓度为10 mg/mL的标准液待用,2-8℃可保存2周。

三、测定步骤

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至655nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2、标准溶液的制备:临用前将10mg/mL标准液用蒸馏水稀释至4、2、1、0.5、0.25、0.125、0(空白管)mg/mL标准溶液待测。

3、样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):

试剂(uL)标准管测定管
试剂R1150150
试剂R2140140
样本-1000
标准液1000-
涡旋混匀,室温静置15min,8000g,常温离心10min,取1000uL上清液至1mL玻璃比色皿中,测655nm下吸光值A,分别记为A标准、A测定、A空白。ΔA测定=A测定-A空白,ΔA标准=A标准-A空白。标准曲线和空白管只需测1-2次。

四、山梨醇含量计算

1、根据标准管的浓度(y,mg/mL)和吸光度A(x,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将A测定(x,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(y,mg/mL)。

2、按照样本质量计算

山梨醇含量(mg/g质量)=y×V1÷(W×V1÷V2)

3、按照样本蛋白浓度计算

山梨醇含量(mg/mg prot)=y×V1÷(V1×Cpr)

V1:加入样本体积;

V2:加入蒸馏水体积;

Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;

W:样本质量,g。


注意事项:

如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。


本试剂盒仅供科研使用!


在线咨询 联系方式 二维码

服务热线

021-60498804

扫一扫,关注我们