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| Cat. Number | HK21376-96S |
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| Chemical Name | 葡萄糖含量测试盒(更精确的方法)(酶标板法) |
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| Qty 1 |
100T/96S |
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| References | 葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。 测定原理： 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505 nm有特征吸收峰。 需要的仪器，耗材: 1、可见分光光度计/酶标仪 2、台式离心机 3、可调式移液器 4、微量石英比色皿/96孔板 5、研钵、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 一、样本处理（具体比例可参考文献） 1. 组织的处理：按照组织质量（g）：蒸馏水体积（mL）为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水），研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸10 min（盖紧，防止水分散失），冷却至室温后，8000g，25℃离心10min，取上清液备用。 2. 细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 蒸馏水），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），置沸水浴中煮沸10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心10min，取上清液备用。 二、试剂准备 混合试剂的配制：使用前将试剂R2和试剂R3 1:1 等体积混合，用多少配多少。 三、测定 1、酶标仪或分光光度计预热 30min。波长调至 505nm，分光光度计蒸馏水调零。 2、样本测定。 在 1.5mL 离心管中依次加入下列试剂：
混匀，置 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴中，保温15min，于 505nm 波长处读取吸光度，分别记为A 空白，A 标准和A测定。ΔA 标准=A 标准-A 空白，ΔA 测定=A 测定-A 空白。 四、葡萄糖含量计算 1、按蛋白浓度计算 葡萄糖含量（μmol/mg prot）＝（C标准×V样）×ΔA 测定÷ΔA 标准÷（Cpr×V样） 2、按样本鲜重计算 葡萄糖含量（μmol/g 鲜重）＝（C标准×V 样）×ΔA 测定÷ΔA 标准÷（W×V 样÷V样总) 3、按细菌或细胞数量计算 葡萄糖含量（μmol/104 cell）＝(C标准×V 样)×ΔA 测定÷ΔA 标准÷（500×V 样÷V样总） C 标准：标准管浓度； V样：加入样本体积； V样总：样本总体积； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本质量，g； 500：细菌或细胞总数，500 万。 注意事项： 如果样本吸光值大于1.2，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。 本试剂盒仅供科研使用! |
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