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Cat. Number

HK21363-48S

Chemical Name

HK21363-48S 尿素氮测试盒(可见分光光度法)

Qty 1

50T/48S

References

尿素（BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。

测定原理：

用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N，在630nm处检测，生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

产品组成：

实验步骤：

注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

组织：按照质量（g）﹕蒸馏水体积(mL)为 1﹕5-10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL 蒸馏水），冰上匀浆后于4℃，13000g 离心15min，取上清待测。

细菌或细胞：按照细胞数量（10⁴ 个）﹕蒸馏水体积（mL）为500-1000﹕1 的比例（建议500 万个细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，13000g 离心15min，取上清置于冰上待测。

血清（浆）或其它液体：直接检测。

二、试剂准备

1、试剂R1：临用前加5mL 蒸馏水充分溶解，现用现配，4℃可保存一周。

2、试剂R3：临用前将A 液倒入B 液中混合，或者根据比例（A:B=1:4）现用现配。

3、标准品：10 mg 尿素。临用前加入4.66 mL 蒸馏水配制成1 mg/mL 尿素氮标准液。

三、测定步骤

1. 分光光度计预热30min，波长调至630nm，蒸馏水调零。

2. 将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至25μg/mL备用。

3. 加样表：

试剂名称(uL)	空白管	标准管	测定管	对照管
样本	-	-	60	60
标准品	-	60	-	-
蒸馏水	60	-	-	120
试剂R1	120	120	120	-
试剂R2	220	220	220	220
充分混匀，于37℃反应10min
试剂R3	80	80	80	80
试剂R4	60	60	60	60
充分混匀，37℃静置30min
蒸馏水	460	460	460	460
充分混匀后，测定630nm 处吸光值，记为A 空白管、A 标准管、A 测定管和A 对照管。计算ΔA 标准=A 标准管-A 空白管，ΔA 测定=A 测定管-A 对照管。