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| Cat. Number | C003-100T分光光度计法 |
| Chemical Name | Bradford法总蛋白含量测试试剂盒-C003-100T 分光光度计法 |
| Qty 1 |
kit |
| Appearance | liquid |
| Synonym | Bradford法总蛋白含量测试试剂盒-C003-100T 分光光度计法 |
| Storage condition | 试剂一：4℃避光保存；试剂二-20℃保存 |
| Stability | 12个月 |
| References | Bradford法总蛋白含量测试试剂盒 （C003-100T 分光光度计法） 一、测定原理 在酸性溶液中，考马斯亮蓝G250（Coomassie brilliant blue G250）染料主要与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸和赖氨酸）和芳香族氨基酸的残基通过疏水力相结合，从而使染料的最大吸收峰由波长465nm变为波长595nm，溶液的颜色由棕红色变为蓝色。在一定蛋白浓度范围内，溶液在波长595nm处的吸光度与蛋白质浓度呈线性关系。根据标准蛋白溶液绘制标准曲线，就可通过测定样品在波长595nm的吸光度计算样品的蛋白质浓度；然后根据公式计算生物样品的可溶性蛋白质含量。 二、试剂组成 试剂一：显色液 200ml×2瓶 试剂二：2.5mg/ml结晶牛血清蛋白（BSA）标准品，0.5ml×1瓶 三、储存条件及有效期 试剂一：4℃避光保存；试剂二-20℃保存。可保存12个月。
四、试剂的配制 标准品的配制：在试剂二瓶中加入4.5mL双蒸水，充分混匀，得到5ml浓度为250μg/ml的标准蛋白溶液。分别移取0，100，200，300，400，600，800，1000μL于空试管中，加入1000，900，800，700，600，400，200，0μL双蒸水，得到0，25，50，75，100，150，200，250μg/ml的BSA标准品应用液。
五、操作步骤
六、计算方法 1. 绘制标准曲线 以标准蛋白溶液浓度0，25，50，75，100，150，200，250μg/ml为横坐标，以酶标仪测得的吸光值为纵坐标，绘制标准曲线并得到方程，一般认为相关系数（R2）大于0.99可用。实测得标准曲线如下：
2. 计算样品浓度 由计算得到的方程求样品浓度。 七、注意事项 1. 染色液接触皮肤后较难清洗，请务必戴手套操作。本实验用过的比色皿及试管请在实验结束后尽快使用酒精清洗，避免比色皿被染色。 2. 本方法灵敏度高，可以测定最低至25μg/mL的蛋白质浓度，蛋白浓度过高会超出标准曲线线性范围，务必稀释后测定。推荐标曲范围0-250μg/mL，但实测0-500μg/mL浓度范围内标曲相关系数通常能够达到要求以上。具体范围请用户根据标曲制作情况判断。 3. Bradford法测定蛋白浓度不受一般浓度还原型试剂如β-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)影响；但受去垢剂影响。如样品处理时加入过SDS、Triton X-100、Tween 等试剂，建议改用其它方法如BCA法测定。 相关试剂盒:1. 氮自由基（DPPH）清除能力测试试剂盒(分光光度计法和酶标板法) 2. 超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 3. 铁离子还原能力测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 4. 总多酚含量测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 5. 总黄酮含量测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 1. 氮自由基（DPPH）清除能力测试试剂盒(分光光度计法和酶标板法) 2. 超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) |
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