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/ Products Classification 点击展开+Cat. Number | 总蛋白含量测试-C003-1000T |
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Chemical Name | Bradford总蛋白含量测试试剂盒-C003-1000T 酶标板法 |
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Qty 1 |
1kit |
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Appearance | liquid |
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Synonym | Bradford总蛋白含量测试试剂盒-C003-1000T 酶标板法 |
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Storage condition | 试剂一:4℃避光保存;试剂二-20℃保存 |
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Stability | 12个月 |
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References | Bradford总蛋白含量测试试剂盒(C003-1000T 酶标板法)一、测定原理在酸性溶液中,考马斯亮蓝G250(Coomassie brilliant blue G250)染料主要与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸和赖氨酸)和芳香族氨基酸的残基通过疏水力相结合,从而使染料的最大吸收峰由波长465nm变为波长595nm,溶液的颜色由棕红色变为蓝色。在一定蛋白浓度范围内,溶液在波长595nm处的吸光度与蛋白质浓度呈线性关系。根据标准蛋白溶液绘制标准曲线,就可通过测定样品在波长595nm的吸光度计算样品的蛋白质浓度;然后根据公式计算生物样品的可溶性蛋白质含量。
二、试剂组成试剂一:显色液 100ml×2瓶 试剂二:2.5mg/ml结晶牛血清蛋白(BSA)标准品,0.5ml×3管
三、储存条件及有效期试剂一:4℃避光保存;试剂二-20℃保存。可保存12个月。
四、试剂的配制标准品的配制:移取100μL试剂二(标准品),加入900μL双蒸水,充分混匀,得到1ml浓度为250μg/ml的标准蛋白溶液,分别移取0,2,4,6,8,12,16,20μL于酶标板中,加入20,18,16,14,12,8,4,0μL双蒸水,得到0,25,50,75,100,150,200,250μg/ml的BSA标准品应用液。
五、操作步骤
六、注意事项1. 染色液接触皮肤后较难清洗,请务必戴手套操作。 2. 本方法灵敏度高,可以测定最低至25μg/mL的蛋白质浓度,蛋白浓度过高会超出标准曲线线性范围,务必稀释后测定。推荐标曲范围0-250μg/mL,但实测0-400μg/mL浓度范围内标曲相关系数通常能够达到0.999以上。具体范围请用户根据标曲制作情况判断。 3. Bradford法测定蛋白浓度不受一般浓度还原型试剂如β-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)影响;但受去垢剂影响。如样品处理时加入过SDS、Triton X-100、Tween 等试剂,建议改用其它方法如BCA法测定。 相关试剂盒:1. 氮自由基(DPPH)清除能力测试试剂盒(分光光度计法和酶标板法)2. 超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 3. 铁离子还原能力测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 4. 总多酚含量测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 5. 总黄酮含量测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) 1. 氮自由基(DPPH)清除能力测试试剂盒(分光光度计法和酶标板法) 2. 超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒 (分光光度计法和酶标板法) |
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