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赖氨酰肽链内切酶质谱级 Lysyl Endopeptidase

Chemical Name

赖氨酰肽链内切酶质谱级 Lysyl Endopeptidase

Qty 1

20μg×5

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质谱级赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase

赖氨酰肽链内切酶（Lysyl Endopeptidase）最初由Masaki等人从土壤细菌中分离得到。该酶可以特异性剪切除赖氨酸残基C末端和S-氨乙基半胱氨酸残基的肽键，用于蛋白测序和Lys-X 化合物的酶催化合成。上海惠诚生物专业提供多种级别赖氨酰肽链内切酶，该酶稳定性高，在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小时之后，仍然拥有完整的生物活性。订购热线：021-60498804

质谱级赖氨酰肽链内切酶是质谱分析前处理时最常用的蛋白分解酶。若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶，可更好地切断赖氨酸基团的多肽，增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装，是方便使用的冷冻干燥品。

质谱级赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 理化特性

表1赖氨酰肽链内切酶理化特性表

外观	冻干粉（包含2 mmol/L Tris-HCl buffer，pH 8）	活性	0.03~0.07AU/vial
分子量	27,000（凝胶过滤）；30,000 (SDS-PAGE)	溶解性	易溶于水或缓冲液
最佳pH	9.0-9.5（酰胺酶的最佳活性pH）	等电点	6.9-7.0
抑制剂	DFP、PMSF、TLCK	来源	细菌
稳定性	溶于pH 值5.0-12.0 的Tris缓冲液中，可于4℃稳定保存2年。溶于pH 值6.0-11.0 的缓冲液中，可于30℃稳定保存，但是50℃及以上不稳定。
单位定义	一单位酰胺酶(AU) 指在30℃ pH 9.5 时每分钟产生1 μmol 对硝基苯胺所需的酶量。
底物特异性	水解底物：Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
底物特异性	非水解底物：Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA

质谱级赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 产品特点

高特异性、高蛋白质消化率、适用于蛋白质谱分析
提高裂解效率、增加肽段数量
根据使用量特意制备小包装，方便使用

质谱级赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 应用实例

分别采用胰蛋白酶(Tp)、赖氨酰肽链内切酶(Lep) 和Tp 与Lep联用进行胶内酶切的效果比较：牛血清蛋白BSA 的条带(100ng) 通过SDS-PAGE 获得，然后分别用Tp、Lep 和Lep+Tp 进行酶切，再用MALDI-TOFMS 法进行分析。蛋白酶的实验效果如下表：

表2 Tp、Lep 和 Lep+Tp 的蛋白酶酶切结果对照

	Tp	Lep	Lep +Tp
裂解位点	精氨酸和赖氨酸的C端	赖氨酸的C端	精氨酸和赖氨酸的C端
错误裂解率 (错误裂解所占比例)	多(8%)	很少(0%)	少(3%)
鉴定出的多肽数量	17	19	22

结果表明 Lep 酶解的错误裂解率最低，Tp酶解时加入Lep后，错误裂解率有所降低，同时，可以鉴定出更多的多肽。

图1 胰蛋白酶 (Tp)(图 a) 和赖氨酰肽链内切酶 (Lep)+Tp (图 b) 酶切后的质谱结果对照图。

Lep+Tp酶切后，可以在m/z=2000时得到吸收峰，而单独的Tp酶切在m/z=2000时没有吸收峰。该结果表明Lep可以提高测序覆盖度。

质谱级赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 产品列表

产品名称	产品规格	产品等级
Lysyl Endopeptidase, MS Grade 赖氨酰肽链内切酶，MS级	20μgx5	质谱级
Lysyl Endopeptidase (R) 赖氨酰肽链内切酶	1vial(2AU)	for Biochemistry
Lysyl Endopeptidase (R) 赖氨酰肽链内切酶	1vial(10AU)	for Biochemistry

质谱级赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 参考文献

Wada, Y., and Kadoya, M.: J. Mass Spectrom., 38, 117 (2003).
Shevchenko, A., Wilm, MM., Vorm, O., and Mann., M.: Anal. Chem., 68, 850 (1996).
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