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IX2全内反射荧光显微镜(TIRFM)——极高敏感度荧光系统 |
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IX2全内反射荧光显微镜(TIRFM)——极高敏感度荧光系统 |
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| IX2全内反射荧光显微镜(TIRFM)——极高敏感度荧光系统的详细资料： |
| IX2全内反射荧光显微镜(TIRFM)——极高敏感度荧光系统
目前OLYMPUS已经推出了第三代的全内反射荧光显微镜（Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy，TIRFM）照明系统。自从1998 OLYMPUS推出了世界上第一台商业用TIRFM照明器，新开发的产品更加强化了我们在该领域的领先地位。高数值孔径复消色差物镜100x/1.65NA 和60x/1.45NA更加完善了我们的系统。TIRFM是一种非常特殊的光学技术，目前已经被细胞生物学家和神经科学家广泛应用，使用该技术可以观察到单分子和研究细胞膜。
TIRFM技术依赖于斜射光线在两种不同折射率光学介质表面产生的极浅的消逝波。该效应产生的条件是入射介质折射率大于折射介质，并且斜射照射到光学界面时入射角大于全反射临界角。残余的消逝波扩散进入低折射率介质，并且随着扩散深度的增加，光强成指数递减。利用消逝波极浅的穿透性，可以在光学表面100nm以内照明和激发荧光染料，因此几乎完全排除了细胞体内的自发荧光干扰，与传统荧光照明技术相比，极大的改善了图像的信噪比。Olympus是第一家将TIRFM系统开发为商业产品的公司。新一代的TIRFM照明器可以通过光纤同时提供3种不同波长的多谱线照明。在安装照明器时不需要对IX2显微镜的镜体改造。内置千分尺可以非常方便的调节激光照明。
我们的物镜TIRFM系统支持传统的反射和透射宽视野观察，如明场、暗场、相衬和微分干涉衬（DIC）观察。 物镜TIRFM系统不同于棱镜TIRFM系统，棱镜TIRFM系统需要在标本上方安装价格昂贵的棱镜系统，而且安装棱镜还会使透射光观察技术受限制，并会造成标本振动。物镜TIRFM系统技术的核心是OLYMPUS引以为豪的独特的复消色差TIRFM物镜，包括两种100x and 一种60x 物镜，其数值孔径更是分别达到了1.65 和 1.45。 使用100X TIRFM物镜，其明场荧光显微镜的亮度比传统100Xoil/1.4N.A. 物镜提高了28%，分辨率也由0.240μm提高到0.203μm。这种高数值孔径的TIRFM物镜同时优化了有效操作面的调整和激光照明角度的调节。此外，TIRMF物镜也适用于其他反射光技术。
Sanford M. Simon et. al.
The Rockefeller University
Laboratory of Cellular BiophysicsGreen:Vamp7-CFPRED:LDLR-YFP为消逝波照明设计的三种高数值孔径
100X N.A.: 1.65
极高的数值孔径，提供非常明亮的荧光图像
目前世界很高的分辨率
可以提供更大角度的倾斜照明，因此可以产生极浅的消逝波
需要特殊的镜油和盖玻片100X N.A.: 1.45
更高的性价比和方便的操作性
可以使用常用的标准镜油和盖玻片60X N.A.: 1.45
更容易接受的价格和更方便的操作性
可以兼容高对比度和高分辨率DIC棱镜
结合IX71或IX81内置1.6X变倍，可以提供96X 放大
可以校正温度引起的球差变化
可以使用常用的标准镜油和盖玻片激光保护
激光通过单模式（single mode）光纤直接导入显微镜。采用联动模式放置激光射出显微镜或通过目镜刺激到眼睛。引入多激光
通过可选的激光整合器可以同时引入3条激光。
可使用激光：
Argon 488nm，HeNe-R 633nm，HeNe-G 543nm简单调节即可完成激光照明调节
对单模式（single mode）光纤激光头和TIRFM照明器进行初始调节后，后期的调节只需要简单的调节千分尺，就可以改变TIRFM照明。可以使用弧光灯观察荧光
TIRFM照明器可以同时连接标准的弧光灯照明器，允许同时观察消逝波和标准照明荧光。 |
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