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Blue-Gal检测β-半乳糖苷酶技术原理和主要应用
β-半乳糖苷酶 β-galactosidase存在于多种细菌、真核生物细胞和一些病原体中，参与乳糖代谢与细胞衰老过程。β-半乳糖苷酶在哺乳动物体内其主要存在于肠道菌群中，但在老化细胞也有一定活性。β-半乳糖苷酶广泛存在于生物体，在演化与生存过程中发挥重要作用。
Blue-Gal是一种β-半乳糖苷酶重要的显色底物，可产生比 X-gal更深的蓝色。β-半乳糖苷酶水解 blue-gal 产生不溶于乙醇和二甲苯的蓝色沉淀物，适于免疫印迹和免疫细胞化学分析。Blue-Gal是一种广泛应用于组织化学、细胞生物学、分子生物学与酶学研究的重要化学试剂。它通过检测β-半乳糖苷酶的活性与表达，为肿瘤研究、干细胞分化、基因表达调控与细胞活性评价提供有效工具。
规格参数：
HGS-01045 5-溴-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 Blue-Gal Bluo-Gal 97753-82-7
Blue-Gal检测β-半乳糖苷酶技术原理：
Blue-Gal在β-半乳糖苷酶的作用下可被水解生成半乳糖和5-溴-4-氯-3-吡啶-2-醛，后者与氢氧化铁反应生成蓝色产物。
Blue-Gal检测β-半乳糖苷酶活性步骤:
1. 向样品中加入Blue-Gal底物，如果样品中存在β-半乳糖苷酶，Blue-Gal将被水解；否则Blue-Gal保持不变。
2. 反应一定时间后，加入氢氧化铁(Fehling试剂)，如果Blue-Gal被水解，会与氢氧化铁反应生成蓝色产物；否则无色。
3. 通过显微镜下的蓝色沉淀或蓝色溶液判断β-半乳糖苷酶的存在与否。或者测量蓝色产物的吸光度，根据标准曲线计算酶活性或浓度。
4. 根据反应条件如时间、温度、pH等控制变量，可以检测β-半乳糖苷酶活性的变化或酶反应动力学，以评价不同因素对其活性的影响。
5. 也可以在固定反应条件下，比较不同样品中蓝色产物的生成，以判断β-半乳糖苷酶活性或表达的高低。这用于转基因检测、细胞活性比较等。
Blue-Gal检测β-半乳糖苷酶主要应用:
1. 组织化学染色
Blue-Gal用于检测组织内β-半乳糖苷酶活性或β-gal过表达，实现组织化学染色。常用于检测肿瘤组织在癌变过程中lacZ基因表达变化。
2. 干细胞和分子生物学研究
Blue-Gal用于检测干细胞向特定类型细胞的分化过程中lacZ基因的表达，以监测干细胞向目标细胞的定向分化。也用于研究lacZ基因在胚胎发育与分子信号转导过程中的表达调控。
3. 转基因检测
Blue-Gal用于检测不同组织及细胞中转入的lacZ报告基因表达,实现对组织特异性启动子活性与组织向性的检测评价。
4. 细胞活性与毒性检测
Blue-Gal用于检测不同条件下细胞内β-半乳糖苷酶活性的变化，间接反映细胞代谢活性的增强或抑制，用于细胞活性与毒性检测。如某些试剂对β-半乳糖苷酶活性的影响可判断其对细胞活性的作用。
5. 酶学研究
Blue-Gal作为β-半乳糖苷酶的重要底物，用于研究β-半乳糖苷酶的酶学性质、基因调控作用机制以及激活与抑制因素，为酶学基础研究提供工具。
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