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Blue-Gal与IPTG联合用于蓝/白斑筛选技术原理和应用
分子克隆实验是分子生物学中常见的一个实验。感兴趣的基因插入到表达载体中，而后转化进入宿主内，但是并非所有质粒都包含目的基因，怎样筛查出包含有目的基因的菌落呢？蓝白斑筛选法可能是使用最为广泛的用来筛选含插入片段的目的菌落的方法。
Blue-Gal与IPTG可联合用于分子生物学中的蓝白斑筛选技术。Blue-Gal与IPTG联合应用实现了lacZ基因在大肠杆菌中的有效表达，基于蓝斑的形成检测了启动子活性、蛋白结合以及核苷酸变异，为重组DNA技术提供了重要工具，在分子生物学研究中有较广泛应用。
规格参数：
HGS-01045 5-溴-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 Blue-Gal Bluo-Gal 97753-82-7
HA21014 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG 367-93-1 1g/5g 30元/85元
Blue-Gal与IPTG联合使用原理：
IPTG作为lac操纵子的诱导剂，可诱导含lac操纵子的重组质粒在大肠杆菌中的表达。Blue-Gal作为lacZ报告基因的底物，在其表达时可被β-半乳糖苷酶水解，生成蓝色产物，产生蓝斑。没有lacZ表达的细菌培养物保持白色，产生白斑。通过蓝白斑的对比，可检测重组质粒的表达与否。
Blue-Gal与IPTG联合使用的应用：
(1)重组质粒的筛选
将含有不同序列的重组质粒转入大肠杆菌，IPTG诱导并与Blue-Gal作用，通过蓝白斑的形成判断哪些质粒表达了lacZ，实现正向筛选。
(2)启动子活性的检测
将不同启动子控制的lacZ报告基因重组质粒转入大肠杆菌，IPTG诱导并与Blue-Gal反应，启动子活性越高的，蓝斑出现越多，用于评价启动子的活性强弱。
(3)变异体的筛选
将lacZ作为报告基因的重组质粒随机诱变后转入大肠杆菌，IPTG诱导并与Blue-Gal作用，检测蓝斑消失的变异菌株，找出影响基因表达的重要区段或关键核苷酸。
(4)蛋白相互作用的检测
在两个蛋白质之间克隆lacZ，使两蛋白的相互作用可导致lacZ表达。将重组质粒转入大肠杆菌，在不同条件下IPTG诱导并Blue-Gal染色，检测蓝斑的形成与消失，判断两蛋白的相互作用与结合。
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