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影响蛋白活性的因素主要有溶液的PH值、盐分和糖分的浓度、微生物的作用及空气的氧化等。蛋白保护剂主要用于微孔板的封闭稳定、抗体稀释液、蛋白稀释液、酶稳定液等。目前蛋白保护剂主要包括:多羟基化合物、糖、氨基酸、聚合物、蛋白质等。


甘油可以增加蛋白质的稳定性,降低buffer的极性,从而防止蛋白疏水聚集,也可以减少蛋白样品处理过程中的非特异性吸附,因此常常用在纯化的buffer中,可以一定程度上稳定蛋白质,提高收率。


蛋白需要储存在-20°C冷冻保护剂溶液中,需将蛋白质保存在含有25-50% (w/v)甘油或乙二醇的溶液中,放在冰箱里。首先,在这种较低的温度下,你的蛋白质更能抵抗微生物污染、蛋白酶降解和氧化。用甘油或乙二醇稀释它们会使它们保持在溶液中,让你很容易重新采样。此外,以这种方式储存的蛋白质可以保存长达一年。


甘油的含量取决于所研究的蛋白质。必须储存在-20冷冻室,高量的甘油是更好的(例如T7 RNA聚合酶储存在-20冷冻室通常有50%的甘油)。在这种情况下,不需要闪冻。作为标准,蛋白质制剂中含有10%的甘油,并使用液氮快速冷冻在-80冷冻室中储存是很好的。


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