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胎球蛋白A在细胞培养中的作用(提供kg级)


胎球蛋白(fetuin)能够增加细胞生长率以及提高蛋白质的表达。由于其在细胞培养中抑制蛋白水解酶的活性,故能加强细胞间的接触和细胞的延伸。目前,胎球蛋白(fetuin)主要用于细胞培养,特别是在无血清细胞培养中能增加细胞生长和复制。


胎球蛋白A是一种血清糖蛋白,由肝脏合成和分泌,少量由肾脏、胎盘和舌头分泌。它含有高含量的糖基,包括唾液酸残基。胎球蛋白A的分子质量范围从51到67 kDa取决于碳水化合物的含量。胎球蛋白A是半胱氨酸蛋白家族的一员,尽管它缺乏半胱氨酸蛋白酶抑制能力。


胎牛血清通常用于补充生长培养基,由于血清蛋白过多,其细胞粘附因子的身份仍然是一个谜。在目前的分析研究中,发现胎球蛋白A是一个主要的血清细胞粘附因子,特别是肿瘤细胞,其在组织培养中细胞粘附的功能一直被争论多年。


研究通过胶质考马斯氏染色凝胶,获得了保持生物活性的均匀蛋白带,发现肿瘤细胞粘附在固定的胎球蛋白A上,而不是其主要污染物α2-大球蛋白上。细胞与胎牛血清的相互作用主要由Ca2+离子驱动,在添加胎牛血清的常规培养基中生长的细胞与胎牛血清中生长的细胞一样对胞外Ca2+离子的丢失比较敏感。


通过人血清的分离显示,细胞附着仅限于含有胎球蛋白A的部分。有趣的是,肿瘤细胞也吸收了胎球蛋白A,并使用一种在活细胞中可以观察到的未知机制将其分泌回培养基中。肿瘤细胞与胎球蛋白A的附着伴随着磷脂酰肌醇3-激酶/Akt的激活,在缺乏胎球蛋白A的细胞表面受体之一Annexin-A6的细胞中被下调。胎球蛋白A在体外肿瘤细胞生长机制中非常重要,并为该蛋白的研究开辟了新的前景。

无血清培养基被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的铁转蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物反应器剪切力,作为脂质和其他生长分化因子的载体等。但是目前胎球蛋白A均为mg级别,限制该蛋白的应用。可以提供克级甚至千克级别的胎球蛋白A,在该蛋白的研究中尤其重要。


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