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无血清培养基用于细胞培养,提供了更方便的纯化和下游加工处理以及更稳定的性能。无血清培养基的选择通常根据:(1)细胞或产物特异性; (2)细胞系对无血清培养基的适应性。


1、细胞或产物特异性

如果使用无血清培养基是为了促进一种特殊类型细胞的生长,那么这种选择性是由培养基的选择性决定的。例如,MCDB 153用于培养表皮角质细胞,LHC-9用于培养支气管上皮细胞,HITES用于培养小细胞肺癌细胞、MCDB130用于培养内皮细胞等。

如果只是为了不用血清培养连续细胞系,如CHO细胞或杂交瘤细胞,从而减少细胞产物中含有滤过性毒素或血清蛋白的可能,那么这种选择的范围就会更广,并有许多可供选择。然而,可能有必要筛选不同厂家的商品,以确保:①细胞生长;②产物结构可以持;③不需要长的适应期;④到货时间和价格可以接受。

当从创建者或知名的细胞库获得一个细胞系的时候,他们会推荐合适的培养基,除非培养基无货或与其他成分不匹配才需更换培养基。可能的话,最好还是用创建者推荐的培养基,因为它可能是确保该细胞系保持其特异性的唯一途径。可参考本文的部分无血清培养基的适应性。


2、细胞系对无血清培养基的适应性

许多连续细胞系,如HeLa、CHO-K1或小鼠骨髓瘤可能可以适应缺乏血清的生长环境。适应过程常常是一个很长的选择周期,此间只有细胞群体中的少数被选择出来,因此在此选择过程中确保细胞系的性质不丧失是很重要的。如果是骨髓瘤细胞,其目的是用于制备杂交瘤;而如果是CHO细胞,则是用于转染实验,因此用无血清培养基的选择培养必须在融合和转染之前进行,使选择过程中丢失特性的危险性降到最低。

适应无血清培养基通常要经过几次连续的传代培养,在每次传代时或传代前,或根据适应的程度确定更换频率,使血清浓度逐渐降低。一旦细胞在某一血清浓度条件下形成稳定的增殖状态,就可用更低浓度的血清将细胞传代培养,直至稳定的生长增殖再次形成,而后再次稀释血清。

如果是悬浮培养,要计算活细胞的数量,根据活细胞的数量稀释细胞悬液,此时需要保持的最低细胞浓度要比正常传代培养所需的细胞浓度高一些。对于单层细胞培养,可在传代培养的前几天先降低培养基中的血清浓度,而后再用新的低浓度培养基进行传代培养。在适应过程中,可能我要在培养基中添加一些已知的因子来代替血清。

对于那些在无血清培养基中生长的增殖细胞,加入血清有可能抑制其生长。生长因子, 如TGF-B能够抑制上皮细胞的生长,EGF抑制A431细胞的生长。


部分无血清培养基的适应性总结:

细胞或细胞系:A549

无血清培养基: PeproGrow-1

细胞或细胞系:脂肪细胞

无血清培养基: 前脂肪细胞生长培养基、前脂肪细胞分化培养基、脂肪细胞营养培养基

细胞或细胞系:星形胶质细胞-神经胶质细胞、BHK21

无血清培养基: HyQ PF CHO;HyG PF CHO MPS;PC-1

细胞或细胞系:支气管上皮细胞

无血清培养基:LHC-9

细胞或细胞系:鸡胚成纤维细胞

无血清培养基:MCDB201,202

细胞或细胞系:中国仓鼠卵巢细胞(CHO)

无血清培养基:MCDB302,PC-1 H

细胞或细胞系:软骨细胞

无血清培养基:添加组分的DMEM/F12

细胞或细胞系:连续细胞系

无血清培养基:Eagle's MEM,M199,MB752/1,CMRL1066,MCDB培养基,DMEM:F12+补充物

细胞或细胞系:角膜上皮细胞

无血清培养基:MCDB153

细胞或细胞系:角膜内皮细胞、COS-1、COS-7

无血清培养基:人角膜内皮细胞培养无血清培养基;人内皮细胞-SFM

细胞或细胞系:内皮细胞

无血清培养基:MCDB130,MCDB131;EndoGRO-LS;内皮细胞-SFM

细胞或细胞系:成纤维细胞

无血清培养基:MCDB110,MCDB202,MCDB402

细胞或细胞系:神经胶质细胞

无血清培养基:星形胶质细胞培养基

细胞或细胞系:神经胶质瘤细胞

无血清培养基:SF12(添加了明确的必需氨基酸及非必需氨基酸的Ham's F12)

细胞或细胞系:HEK293

无血清培养基:HEKTOR;HEK;CDM4;HEK293

细胞或细胞系:HeLa 细胞

无血清培养基:Ex-Cell

细胞或细胞系:造血细胞

无血清培养基:a-MEM;Iscove's

细胞或细胞系:肝细胞

无血清培养基:Hepato; Hepatozyme;Hepatocyte Growth Medium

细胞或细胞系:HL60、HT-29、人二倍体成纤维细胞

无血清培养基:MCDB110,MCDB202:PC-1

细胞或细胞系:人白血病细胞和正常白细胞

无血清培养基:Iscove's

细胞或细胞系:人肿瘤细胞

无血清培养基:HITES;Bottenstein N3

细胞或细胞系:肝细胞,肝脏上皮细胞

无血清培养基:Williams E,L15

细胞或细胞系:人ESC

无血清培养基:ESGRO;CellGro;StemLine;StemSpan

细胞或细胞系:杂交瘤

无血清培养基:Iscove's;Ultradoma;Ex-Cell

细胞或细胞系:昆虫细胞

无血清培养基:BaculoGrow

细胞或细胞系:角质形成细胞

无血清培养基:MCDB153

细胞或细胞系:L细胞(L929,LS)

无血清培养基:NCTC109,NCTC135

细胞或细胞系:类淋巴母细胞系(人)

无血清培养基:Iscove's

细胞或细胞系:乳腺上皮细胞

无血清培养基:MCDB170

细胞或细胞系:MDCK狗肾上皮细胞

无血清培养基:K-1;PC-1;再加 MDCK

细胞或细胞系:LLC-PK,猪肾

无血清培养基:K-2

细胞或细胞系:黑色素细胞

无血清培养基:Gilchrest

细胞或细胞系:黑色素瘤细胞

无血清培养基:Gilchrest

细胞或细胞系:小鼠联胎成纤维细胞:3T3细胞

无血清培养基:MCDB 402

细胞或细胞系:小鼠ESC

无血清培养基:ESGRO;NEM

细胞或细胞系:小鼠红白血病

无血清培养基:SF12(添加了明确的必需氨基酸及非必需氨基酸的Ham'sF12),Iscoves's

细胞或细胞系:小鼠成神经细胞瘤

无血清培养基:MCDB411;DMEM:F12/N1

细胞或细胞系:神经细胞

无血清培养基:DMEM:F12/N3;B27/Neurobasal;N2

细胞或细胞系:成骨细胞、前列腺

无血清培养基:WJAC 404

细胞或细胞系:肾(另见HEK-293和MDCK)

无血清培养基:REGM;MsGM

细胞或细胞系:骨骼肌成肌细胞、平滑肌细胞、尿路上皮(Urothelium)

无血清培养基:MCDB 153;KSFMc;KGM-2

细胞或细胞系:Vero

无血清培养基:PFEK-1;PF-Vero; MP-Vero;x-cell Vero

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