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无血清培养基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顾名思义，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可简化纯化和鉴定各种细胞产物的程序，避免病毒污染造成的危害。

培养基2.png

研制针对特殊细胞系或原代培养的无血清培养基主要有两种方法。

第一种方法是找到一个相关细胞类型的已知培养基配方，加或不加10%~20%的透析血清，在某一个血清浓度范围(包括浓度为零)，逐一地改变培养基成分，随后用克隆生长实验来显示某种潜在的血清替代物的任何补偿效果，即在替代物存在时减少血清可达到相同的克隆生长率。

在最低血清浓度下，确定最佳混合物浓度，它仍将使细达到相同的克隆生长率。这种方法通常能提供最佳培养条件。如果发现某一组成分对血清的减少起到补充的作用，就通过单种成分的逐一删除将这一活性成分从中筛选出来，然后寻找其最佳浓度。

这种方法的缺点是耗时而繁杂，包括绘制细胞生长的生长曲线，每个阶段作克隆生长分析，找到一种适合新细胞类型的新培养基至少要三年时间。

针对第一种方法耗费时间长，第二种方法：对现有培养基，如RPM11640或DMEM与Ham'sF12的联合培养基加以补充，而且将加入成分的种类限制在一个较小的范围内，再在一个限定的血清浓度下确定最佳浓度，这些添加的组分包括：硒、转铁蛋白、白蛋白、胰岛素、氢化可的松、雌激素、三碘甲状腺氨酸、乙醇胺、磷酸乙醇胺、生长因子(如EGF、FGF、PDGF、VEGF)、前列腺素(PGE、PGF2)和其他有特殊功能的物质。对多数细胞而言，硒、转铁蛋白、胰岛素通常都很重要，但对其他成分的需求则差别较大。

下面以代表性无血清培养基配方示例。MCDB110培养细胞类型为人肺成纤维细胞；MCDB131培养细胞类型为人血管内皮细胞；MCDB170培养细胞类型为乳腺上皮细胞； MCDB202培养细胞类型为鸡胚成纤维细胞；MCDB302培养细胞类型为CHO细胞；MCDB402培养细胞类型为3T3细胞；WAJC404培养细胞类型为前列腺上皮细胞；MCDB153培养细胞类型为角质细胞；Iscove's培养细胞类型为淋巴细胞；LHC-9培养细胞类型为支气管上皮细胞。