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GB/T18932.22-2003蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量测定方法
GB/T18932.22-2003蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量测定方法，采用高效液相色谱(HPLC) 法结合示差折光检测器，选择Innoval NH2色谱柱(5 μm，100 Å，4.6 × 300 mm)对蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖及麦芽糖四种糖类物质进行了测定。结果表明：流动相为乙腈︰水（85︰15, V /V），等度洗脱时，能够实现蜂蜜中四种糖类物质的分离，且保留时间稳定，能够满足检测要求。上海惠诚生物现货提供以下标准品，详细如下：
GY1108 果糖，英文名D-(+)-Sucrose，化学式C6H12O6，相对分子质量180.16，CAS编号57-48-7，结构式为：
GY1107 葡萄糖，英文名D(+)-Glucose，化学式C6H12O6，相对分子质量180.16，CAS编号50-99-7，结构式为：
GY1109 蔗糖，英文名D(+)-Sucrose，化学式C12H22O11，相对分子质量342.3，CAS编号57-50-1，结构式为：
GY1062 麦芽糖，英文名Maltose，化学式C12H22O11，相对分子质量342.3，CAS编号6363-53-7，结构式为：
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，示差折光检测器
试剂材料
纯水(屈臣氏)；乙腈为色谱纯；4种糖类混标：果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖（10 mg/mL）；高效液相色谱柱：Innoval NH2；5 μm，100 Å，4.6 × 300 mm。
样品制备
精确称取蜂蜜样品5 g，置于100 mL的容量瓶中，加入30 mL水，涡旋使试样完全溶解，用乙腈定容至刻度，作为供试品。
色谱条件
色谱柱：Innoval NH2；5 μm，100 Å，4.6 × 300 mm；
流动相：乙腈︰水（85︰15, V/V）；
柱温：25℃；
流速：1.0 mL/min；
进样量：15 uL；
结果与讨论
本实验采用Innoval NH2色谱柱对蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖及麦芽糖四种糖类物质进行了测定。由表1和图1 ~ 6可知，流动相为乙腈-水时，可以较好的分离蜂蜜样品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖四种糖类物质。
表1. Innoval NH2色谱柱蜂蜜中糖类物质测试结果
|
样品名称 |
化合物名称 |
保留时间/min |
理论塔板数 |
分离度 |
|
蜂蜜样品 |
果糖 |
8.212 |
5128 |
— |
|
葡萄糖 |
9.662 |
3552 |
2.3 |
|
|
4种糖混标 |
果糖 |
8.153 |
4341 |
— |
|
葡萄糖 |
9.535 |
3054 |
2.0 |
|
|
蔗糖 |
14.230 |
4285 |
5.1 |
|
|
麦芽糖 |
17.705 |
3748 |
2.9 |
结论
本实验参照GB/T18932.22-2003方法，选用Innoval NH2色谱柱(5 μm；100 Å；4.6 × 300 mm)，对蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖及麦芽糖四种糖类物质进行了测定。四种物质分离效果良好，能够满足检测要求。
相关色谱产品：
|
产品名称 |
规格描述 |
包装数量 |
|
Innoval NH2 |
5 μm,100 Å, 4.6 × 300 mm |
1支 |
|
分析型色谱柱温箱 |
室温+ 5 ~ 50℃，箱内一对夹套 |
1个 |
|
1.5 mL样品瓶 |
短螺纹透明带书写处32 × 11.6 mm |
100/pk |
|
1.5 mL样品瓶盖 |
9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE隔垫45°Shore A; 1.0 mm |
100/pk |
|
针式过滤器 |
单膜，13 mm，0.45 μm |
100个/包 |
|
一次性注射器 |
2 mL无针头 |
100支/包 |
|
乙腈 |
4 L/瓶，UV级 |
4 × 4 L/箱 |
|
57-48-7
|
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