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国标GB 28314-2012 中天然辣椒素与二氢辣椒素的测定
高效液相色谱(HPLC) 法结合紫外检测器，按照GB 28314-2012食品安全国家标准食品添加剂辣椒油树脂标准方法，并选择Venusil○RXBP C18（L） (5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm)色谱柱对辣椒素有关样品进行了测定。结果表明：在波长为280 nm，流动相为甲醇︰水=65︰35 (v\v)时，测得的辣椒样品中天然辣椒素与二氢辣椒碱分离效果良好。
辣椒素是辣椒的活性成分，是辣椒中的主要辣椒元，二氢辣椒素位居第二。它对哺乳动物包括人类都有刺激性并可在口腔中产生灼烧感。纯辣椒素是一种斥水亲脂、无色无嗅的结晶或蜡状化合物，上海惠诚生物提供以下辣椒素与二氢辣椒碱标准品。
表1. 辣椒中部分辣椒元信息
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样品名称 |
英文名 |
分子式 |
分子量 |
CAS编号 |
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C18H27NO3 |
305.41 |
404-86-4 |
||
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C18H29NO3 |
307.43 |
19408-84-5 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
Agela LC-10F高效液相色谱仪，紫外检测器；
试剂材料
甲醇为色谱纯；四氢呋喃为色谱纯；天然辣椒素：白色固体粉末，由上海惠诚生物科技有限公司提供；二氢辣椒素：白色固体粉末，由上海惠诚生物科技有限公司公司提供；辣椒样品
高效液相色谱柱：Venusil®XBP C18（L）；5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm。
样品制备
辣椒样品供试品溶液：取辣椒样品约 1.0 g，精密称定，用甲醇-四氢呋喃（1︰1）混合溶剂超声溶解，并定容至50 mL，经0.45 μm 滤膜过滤，取续滤液5.0 mL，加水5.0 mL 稀释，即得；辣椒素混合标准溶液：分别称取天然辣椒素与二氢辣椒素标准品适量，加甲醇溶解并稀释制成每1.0 mL 中含1.0 mg 的溶液，混匀，取适量后，用甲醇-水（1︰1）稀释制成每1.0 mL 中含20 μg 的溶液，制成辣椒素混合标准溶液。
色谱条件
色谱柱：Venusil XBP C18（L）；5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm；
流动相：甲醇︰水=65︰35 (v\v)；
流 速：1.0 mL/min；
柱 温：30℃；
进样量：20 μL；
波 长：280 nm。
结果与讨论
本实验采用 Venusil○R XBP C18（L）色谱柱对辣椒样品中天然辣椒素及二氢辣椒素进行了测定，由图1、图2 可知，在上述色谱条件下，待测物峰形良好。
结论
本实验按 GB 28314-2012 食品安全国家标准食品添加剂辣椒油树脂标准方法，采用Venusil XBP C18（L）色谱柱对辣椒样品中天然辣椒素与二氢辣椒进行了测定。结果表明天然辣椒素峰与二氢辣椒素峰峰形良好，分离效果满足要求。
附：相关产品
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产品名称 |
规格描述 |
包装数量 |
订货号 |
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Venusil XBP C18（L） |
5 μm，150 Å，4.6 × 250mm |
1支 |
VX952505-L |
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1.5 mL样品瓶 |
短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm |
100/pK |
1109-0519 |
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1.5 mL样品瓶盖 |
9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE隔垫 45°Shore A；1.0 mm |
100/ pK |
0915-1819 |
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针式过滤器 |
单膜，13 mm，0.45 μm |
100个/包 |
AS021345-T |
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一次性注射器 |
2 mL无针头 |
100支/包 |
LZSQ-2ML |
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甲醇 |
4 L/瓶，色谱纯 |
4 × 4 L/箱 |
AH230-4 |
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四氢呋喃 |
4 L/瓶，色谱纯 |
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